To evaluate the approach, we cloned

To evaluate the approach, we cloned eight fragmentsfrom viruses PR8 and A/Chicken/Jiangsu/WS1/2012(H9N2) (WS1)respectively. All eight influenza genes from the cDNA of PR8 andWS1 were efficiently amplified by the fragment specific primersand had the expected molecular mass (Fig. 2). After the recom-bination of the PCR amplicon with the linear vector mediated byenzyme ExnaseTM II, the positive clones were screened by PCRand sequenced. During the screening of positive clones, we foundthat more than 90% of the selected clones were positive. Thispositive rate of clones was similar to that claimed by the Clon-ExpressTM II kit. Through this cloning strategy, we rapidly andefficiently got all positive clones for the eight influenza genesfrom the cDNA of PR8 and WS1 during a single ground of PCRand in vitro recombination. To further evaluate if the cloned genes

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การประเมินวิธีนี้ เราโคลนแปด fragmentsfrom ไวรัส PR8 และ A/ไก่/มณฑล เจียง ซู/WS1/2012 (H9N2) (WS1) ตามลำดับ ทั้งหมด 8 ไข้หวัดใหญ่ TIFA จาก cDNA ของ PR8 andWS1 ได้ efficiently.we จะขยาย โดยการรองพื้นเฉพาะส่วน และได้ผู้เล่นที่คาดว่ามวลโมล (fig. 2) หลังจาก bination recom ของ PCR จากกับเวกเตอร์เชิง mediated byenzyme ExnaseTM II โคลนบวกได้ฉาย โดย PCRand เรียงลำดับ ระหว่างหน้าจอของโคลนบวก เรา มากกว่า 90% ของโคลนที่เลือก foundthat ได้ค่าบวก Thispositive อัตราของโคลนที่อ้าง โดยชุด Clon ExpressTM II ได้ ผ่านกลยุทธ์นี้ cloning เราอย่างรวดเร็ว andefficiently มีโคลนเป็นบวกทั้งหมดสำหรับ genesfrom ไข้หวัดใหญ่แปด cDNA PR8 และ WS1 ระหว่างพื้นดินเดียวของ PCRand ในเครื่อง rekombinasyon การประเมินเพิ่มเติม ถ้า TIFA โคลน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อประเมินวิธีการที่เราโคลนแปด fragmentsfro ไวรัสฉัน PR8 และ / ไก่ / มณฑลเจียงซู / WS1 / 2012 (H9N2) (WS1) ตามลำดับ ทั้งแปดยีนไข้หวัดใหญ่ PR8 andws1 จากเศษ cDNA ถูกขยายได้อย่างมีประสิทธิภาพโดยเฉพาะ primersand ได้มวลโมเลกุลคาดว่า (รูปที่. 2) หลังจากที่ RECOM-binationaler ของ PCR amplicon กับเชิงเส้นพึ่งเวกเตอร์ byenzy exnasetm ครั้งที่สองโคลนบวกผ่านการคัดเลือกจาก pcrand ติดใจ ในระหว่างการตรวจคัดกรองของโคลนบวกเรา foundthat มากกว่า 90% ของโคลนที่เลือกเป็นบวก อัตราการโคลน Thispositiv เป็นแบบเดียวกับที่ stiking โดยชุด Clon-ExpressTM ครั้งที่สอง ผ่านกลยุทธ์การโคลนนี้เรามีทุกอย่างรวดเร็ว andefficiently สำหรับโคลนบวกแปดยีนของโรคไข้หวัดใหญ่ genesfro ฉัน PR8 และ WS1 ในช่วงเดียวของพื้นดิน pcrand หลอดทดลองรวมตัวกันอีก เพื่อเป็นการประเมินว่ายีนที่โคลน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิธีการที่นำมาใช้เพื่อประเมินผลการจำลองมาแปด fragmentsfrom เรา PR 8 และมีการแจ้ง / ' claymation ' / มณฑลเจียงซู / WS1/2012 ( H 9 N 2 ) ( WS 1 ) ตามลำดับ 8 การตัดต่อยีนของโรคไข้หวัดใหญ่ทั้งหมดจากการจัดเตรียม cDNA ของ PR 8 1 ได้อย่างมีประสิทธิภาพมีการขยาย andWS โดยการแยกส่วนที่คาดว่าจะมา primersand เฉพาะมวลโมเลกุล ( รูปที่ 2 ) หลังจากที่ใช้ชิปเซ็ตของ PCR amplicon bination กับเวกเตอร์ (mediated byenzyme EXNASETM เส้นตรง IIโคลนในเชิงบวกที่ได้รับการคัดกรองโดย PCRAND เรียงซีเควนซ์ ในระหว่างการคัดกรองในเชิงบวกของเรา foundthat ที่จำลองมามากกว่า 90% ของการโคลนที่เลือกในเชิงบวก อัตราความเร็วของการจำลองเป็น Thispositive คล้ายกับที่ดำเนินการ / เรียกร้องตามแบบ Express CLON TM II kit ผ่านการโคลนนี้เสนอให้มีการที่เราทำได้ดีทุกด้านบวก andefficiently อย่างรวดเร็วการจำลองสำหรับโรคไข้หวัดนกและการจัดเตรียม cDNA genesfrom แปดของ PR 8 และ WS 1 เพียงครั้งเดียวในระหว่างหนึ่งสายดินของ PCRAND ของหลอดแก้วได้ดำเนินไปอย่างเชื่องช้า เพื่อเป็นการประเมินในกรณีที่จำลองมาจากยีน